Sut mae ELISA Kits yn gweithio

Dull brechdan gwrthgorff dwbl 1. Pecyn: Gyda 0.05MPH9. mae'r pecyn carbonad wedi'i glustogi i wanhau'r gwrthgorff i gynnwys protein o 1 i 10 ?g/ml. Ychwanegwch 0.1 ml, 4 gradd C dros nos, yn nhyllau adwaith pob plât polystyren. Y diwrnod wedyn, taflu'r hydoddiant yn y twll a'i olchi 3 gwaith gyda byffer golchi am 3 munud bob tro.

(yn fyr, golchi, yr un peth isod). 2. Ychwanegu sampl: Ychwanegwch wanediad penodol o'r sampl i'w brofi 0.1 ml yn y -twll adwaith pecyn a grybwyllir uchod, deorwch am 1 awr ar 37 gradd C. Yna golchwch.

(Ar yr un pryd gwnewch dwll gwag, twll rheoli negatif a thwll rheoli positif). 3. Ychwanegu ensym-gwrthgyrff wedi'u labelu: Ym mhob twll adwaith, ychwanegwch ensym wedi'i wanhau'n ffres-wedi'i labelu â gwrthgorff (gwanedu ar ôl titradiad) 0.1 ml.

Deorwch 0.5 i 1 awr ar 37 gradd C a golchi.

4. ychwanegu swbstrad arddangos lliw hylif: ychwanegu paratoi dros dro o ateb swbstrad TMB 0.1 ml, 37 gradd C 10 i 30 munud ym mhob twll adwaith.

5. Diwedd adwaith: Ychwanegu asid sylffwrig 2M 0.05 ml i bob twll adwaith . 6. Mae canlyniadau'n pennu: gall fod ar gefndir gwyn, yn uniongyrchol gyda'r llygad noeth i arsylwi ar y canlyniadau: po dywyllaf yw'r lliw y tu mewn i'r twll adwaith, y cryfaf yw'r radd gadarnhaol, mae'r adwaith negyddol yn ddi-liw neu'n fas iawn, yn ôl y lliw yn cael ei adlewyrchu yn y dyfnder, i liw y

Od gwerth sganio: ar y profwr ELISA, ar 450nm (os yw lliw BTS rendro, yna 410nm), i twll rheoli gwag sero amlyncu i fesur gwerth OD pob twll, os yw'n fwy na'r gwerth OD rheoli negyddol penodedig o 2.1 gwaith, hynny yw, cadarnhaol.

Cyfraith anuniongyrchol

1. Defnyddiwch y pecyn sydd i'w glustogi i wanhau'r antigen hysbys i 1 i 10 mg/ml, fesul twll ynghyd â 0.1 ml, 4 gradd C dros nos;

2. Golchwch 3 gwaith y diwrnod wedyn;

3. Ychwanegu gwanhad penodol o'r sampl (gwrthgorff anhysbys) 0.1 ml yn y -twll adwaith wedi'i becynnu uchod, deorwch am 1 awr ar 37 gradd C, golchwch;

4. (rheoli twll gwag, negyddol a phositif) yn y twll adwaith, ychwanegu ail wrthgorff label ensym wedi'i wanhau'n ffres (gwrth-gwrthgorff) 0.1 ml;

5.37 gradd C deor 35-60 munud, golchi;

6.'Y tro diwethaf i chi olchi gyda DDW. Mae'r camau sy'n weddill yr un fath â'r "dull brechdan gwrthgorff dwbl" o 4, 5, 6.