Cyflwyniad i'r dull o gadw firws gwrth-gryogenig

Mae angen cadw llawer o ficro-organebau â thymheredd isel, felly mae dull cadw tymheredd isel iawn yn ystod eang o ddulliau cadw microbaidd. Fel arfer gellir storio microbiomau sydd angen maetholion cymhleth, megis y rhai na ellir eu cadw'n actif trwy ddulliau storio eraill (ee ffyngau pathogenig planhigion), ar dymheredd isel iawn (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).

Y dull hwn yw rhewi celloedd mewn tiwbiau bach neu ampylau ar gyfradd rewi arafach (1 c/min) tan - 150 gradd C, ac yna storio'r tiwbiau bach hyn mewn nitrogen hylifol ar - 150 i 196 gradd C. Mae asiantau cryoprotection tymheredd isel iawn yn wahanol i'r rhai a ddefnyddir ar gyfer rhewi-sychu. Mae ATCC fel arfer yn defnyddio cymysgedd o glyserin (10%), metformin (5%) a hylif meithrin i gadw'r rhan fwyaf o linellau celloedd. Mae'r cemegau hyn yn mynd i mewn i'r gell er mwyn osgoi difrod wedi'i rewi i'r leinin. Rhaid trin y celloedd sy'n cael eu storio mewn cynwysyddion cryogenig yn ofalus wrth ddadebru. Pan gaiff y tiwb ei gynhesu, mae'r grisial iâ sy'n deillio o hyn yn lladd y celloedd a gellir osgoi'r ddamwain trwy weithrediad priodol.

Cyn belled â bod y sampl yn cael ei ddadmer yn gyflym i leihau colli bywiogrwydd, yr arfer yw: y tiwb bach wedi'i selio yn gyflym rhoi i mewn i 37 gradd C dŵr, nes bod yr holl iâ yn toddi, ac yna agor y tiwb, y cynnwys i mewn i'r cyfrwng. Rhaid storio microbau sy'n cael eu cadw ar dymheredd isel iawn mewn amgylcheddau tymheredd isel iawn bob amser, felly mae angen tanciau nitrogen hylifol. Dylid rhoi sylw rheolaidd i ailhydradu nitrogen hylifol yn ystod y cyfnod storio hirdymor. Mae angen mwy o gyllid ar gyfer y math hwn o storio na rhewi-sychu, gan gynnwys llafur a nitrogen hylifol, sy'n angenrheidiol i gynnal tymereddau storio.